色譜柱在相應的色譜條件下是否可靠并具有持久性能？

已經證實ACE HPLC色譜柱和ACE Excel UHPLC色譜柱具有持久耐用的、可靠的日常性能和卓越的色譜柱壽命。

通過鍵合在硅膠固定相載體上的硅氧烷的酸化水解可以失去鍵合相，從而降低色譜柱的壽命。該酸水解隨著流動相pH的降低和柱溫的升高而增加。

與C18相相比，較短的烷基相如C4和C3以及苯基相通常更容易失去鍵合相。此外，低純度的硅膠固定相載體和低表面覆蓋的固定相載體使得一些鍵合相更易于酸解。
由于使用超高純度的硅膠固定載體粒子以及鍵合相的極高表面覆蓋，ACE鍵合相表現出極高的穩定性。（參見圖9）
盡管所有ACE鍵合相的穩定性都很優異，但是一些鍵合相并不像其它鍵合相那樣穩定。例如，通常認為C18鍵合比柱長較短的烷基相、PFP相和苯基鍵合相更穩定。

實際上，典型的苯基固定相穩定性不佳是該相在方法開發中不常被選擇的主要原因之一。
為了解決這個問題而開發了ACE C18-AR，其允許色譜分析利用強大的π-π和偶極-偶極分離機制，并仍然享有C18相的堅固性及耐用性。

如圖10所示，ACE C18-AR不僅對典型的苯基鍵合相具有非常優異的穩定性，它甚至還比許多其他C18鍵合相表現出更佳的穩定性。

類似地，ACE C18-PFP提供了多種分離機制，可以利用它們實現更佳的總體分離效果，同時從C18相的穩定性中受益。

圖 9：酸穩定性，pH 1.8

條件
色譜柱：ACE 4.6 x 150 mm
流動相：50% CH3CN, 50%水
流速：1.0 mL/min
溫度：22 °C
分析物：菲

酸性暴露條件：
流動相：50% CH3CN 50% 0.1%TFA（溶于水中）（pH 1.8）
流速：1.0 mL/min
溫度：22 ℃

圖10：加速柱穩定性研究：pH 1.9時80℃

酸性暴露條件：
流動相：5:95 MeOH/0.1% TFA（溶于水中）（pH 1.9）
流速：0.20 mL/min
溫度：80 ℃
色譜柱尺寸：50 x 2.1mm
分析物：菲

使用設計用于加速柱降解下的條件，ACE C18-AR相顯示保留損失極少，其壽命相當于高度穩定的ACE C18相。兩種固定相均由相同的超純硅膠而制成，而且比Zorbax SB-C18的耐久性更好(Zorbax SB-C18曾視作在高溫和低pH條件下具有極好穩定性的固定相）。
正如預期的那樣，基于低純度硅膠（Waters Spherisorb ODS2）的C18鍵合柱在這些加速條件下壽命大大降低。
特別值得注意的是常規苯基色譜柱與ACE C18-AR的壽命比較結果。與ACE C18-AR相比，盡管使用高純度二氧化硅，苯基色譜柱的壽命仍降低，這表明ACE C18-AR可能適用于那些使用苯丙基色譜柱壽命短的應用。

將HPLC和UHPLC連接到通常被稱為LC-MS的質譜儀上已經相當普遍。

然而，質譜對可能從HPLC/UHPLC色譜柱上洗脫下來的微量的鍵合相（稱為柱“流失”）非常敏感。柱

流失可能會干擾分析結果，并且重要的是，LC-MS應用中所選擇的色譜柱具有足夠穩定的鍵合相以避免過量的柱流失。

圖11表明ACE C18-PFP色譜柱幾乎沒有“流失”干擾LC-MS分析。

C18-PFP（以及ACE C18和ACEC18-AR）的穩定性使得這些色譜柱更適合LC-MS應用。

圖 11：ACE C18-PFP色譜柱的低柱流失使其成為LC/MS應用中的理想選擇

條件
色譜柱尺寸：50 x 3.0 mm
流動相：梯度：在5分鐘內從5至95% B，95% B時持續5分鐘
A: 0.1％甲酸(溶于水中)
B: 0.1％甲酸(溶于乙腈中)
流速：0.43 mL/min
溫度：60oC
檢測：安捷倫1100 MSD ESI正離子快速掃描模式,快速掃描全50 – 1000 m/z
樣品：空白運行

柱流失可能會干擾LC-MS應用中目標分析物的檢測和測量。

ACE C18-PFP色譜柱未顯示柱流失。

所有ACE色譜柱的低流失特性使其非常適合LC-MS應用。

UHPLC色譜柱可能缺乏耐用性。加上入口篩板堵塞的可能性，您可能面臨色譜柱的耐用性不如HPLC色譜柱的問題。

ACE Excel色譜柱非常寬容，并提供您期望從HPLC色譜柱中獲得的相同耐用性和使用壽命。

ACE Excel將改變您對UHPLC色譜柱耐用性的看法。

ACE Excel色譜柱不僅填裝的更好，還采用了專利的入口篩板設計，使其比其它UHPLC色譜柱更不容易被堵塞。

仍建議您像使用任何UHPLC色譜柱一樣過濾樣品和流動相，但ACE Excel色譜柱比其他UHPLC色譜柱更為寬容，并提供與HPLC色譜柱相同的耐用性和使用壽命。

圖 12：ACE Excel色譜柱在耐用性方面有良好的口碑

將2.1×100mm ACE Excel C18 UHPLC色譜柱在平均1,000 bar（14,500 psi）壓力下進行2000多個梯度的運行。

在該穩定性研究結束時，柱效（塔板數）和保留時間基本保持不變。