進出口食品中羅丹明 B 的檢測的固相萃取方法

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 進出口食品中羅丹明 B 的檢測的固相萃取方法

（SuperClean AL-N）

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC 法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物

羅丹明 B(CAS:81-88-9)

三、應用范圍

本方法適用于進出口食品中羅丹明B 的檢測的HPLC 檢測及確證。

四、參考標準

《SN/T 2430-2010   進出口食品中羅丹明 B 的檢測方法》

五、實驗材料

NuAnalytical SuperClean AL-N 中性氧化鋁固相萃取柱 1g/6mL。

六、實驗方法

1、 樣品待測溶液制備

稱取辣椒粉 2 g（精確至 0.01）于 50 mL 離心管中，準確加入 20 mL 20%丙酮正己烷，于渦旋混勻器上混合提取 2 min，再超聲提取 15 min，于 4000 r/min 離心 5 min，上清液過濾待凈化。

2、活化

依次用 6  mL 正己烷活化。

3、上樣和洗脫

取待凈化液 10 mL 加入中性氧化鋁小柱，1 滴/秒流速通過中性氧化鋁小柱后，棄去溶液，加入 10 mL 丙酮-正己烷溶液(20:80, v/v)淋洗，棄去淋洗液，抽干小柱。取 10 mL 2%氨水甲醇溶液洗脫小柱，收集洗脫液，洗脫液于 50  ℃氮吹至干。

4、重新溶解

用 1 mL 甲醇定容，0.22μm 微孔濾膜過濾，供HPLC 測定。

5、HPLC 條件

色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)

檢測器：Waters 2475  熒光檢測器，λex=550 nm，λem=580 nm

流動相：A:水   B:甲醇

洗脫方式： 等度洗脫，A:B=25 : 75

柱溫：室溫 

流速：1.0 mL/min   

進樣量：20μL

七、實驗結果

1、 25μg/kg 辣椒粉中羅丹明B 的添加回收結果

表 1 25μg/kg 辣椒粉中羅丹明 B 的添加回收結果回收率（%）

名稱   1   2   3 平均回收率（%） RSD（%） 羅丹明B 86.0 88.0 88.0 87.33 1.32

2、添加水平為 25μg/kg 辣椒粉中羅丹明B 檢測色譜圖

圖1  添加水平為25μg/kg辣椒粉中羅丹明B檢測色譜圖