APP ID NO. : FLM-S170014

動(dòng)物性食品中磺胺類藥物多殘留檢測(cè)的固相萃取方法
（PolyClean X-MCX）

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

本研究利用固相萃取法作為豬肉樣品中磺胺類藥物殘留檢測(cè)的前處理方法，HPLC法作為檢測(cè)手段。PolyClean X-MCX(60 mg/3mL)柱凈化效果良好，回收率滿足測(cè)試要求，重現(xiàn)性好，與知名廠商同型號(hào)柱性能相當(dāng)。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物

磺胺醋酰(CAS:144-80-9)，磺胺吡啶(CAS:144-83-2)，磺胺對(duì)甲氧嘧啶(CAS:651-06-9)，磺胺甲基嘧啶(CAS:127-79-7)，磺胺二甲基嘧啶(CAS:57-68-1)。

三、應(yīng)用范圍

本方法適用于動(dòng)物性食品中磺胺類藥物多殘留的HPLC檢測(cè)及確證。

四、參考標(biāo)準(zhǔn)

《GB 29694-2013 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物性食品中13 種磺胺類藥物多殘留的測(cè)定高效液相色譜法》

五、實(shí)驗(yàn)材料

NuAnalyticalPolyCleanX-MCX固相萃取柱60 mg/3 mL，W品牌MCX固相萃取柱6

0mg/3mL。

六、實(shí)驗(yàn)方法

1、樣品待測(cè)溶液制備

稱取豬肉試料(5±0.05)g，于50mL離心管中，加乙酸乙酯20mL，渦旋2min，4000r/min

離心5 min，取上清液于100 mL雞心瓶中，殘?jiān)屑右宜嵋阴?0 mL，重復(fù)提取一次，合

并兩次提取液。雞心瓶中加0.1mol/L鹽酸溶液4mL，于40 ℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至少于3mL，

轉(zhuǎn)至10 mL離心管中。用0.1 mol/L鹽酸溶液2 mL洗雞心瓶，轉(zhuǎn)至同一離心管中。再用正己烷3 mL洗雞心瓶，將正己烷轉(zhuǎn)至同一離心管中，渦旋混和30s，3000r/min離心5min，棄正己烷。再次用正己烷3 mL洗雞心瓶，轉(zhuǎn)至同一離心管中，渦旋混和30 s，3000 r/min離心5 min，棄正己烷，取下層液備用。

2、活化

依次用甲醇2 mL和0.1 mol/L鹽酸溶液2 mL活化。

3、上樣和洗脫

取備用液過(guò)柱，控制流速1 mL/min。依次用0.1 mol/L鹽酸溶液1 mL和50%甲醇乙

腈溶液2 mL淋洗，棄去淋洗液。用5%氨化甲醇4 mL洗脫，收集洗脫液。

4、重新溶解

洗脫液于40 ℃氮?dú)獯蹈桑?.1％甲酸乙腈溶液1.0 mL溶解殘余物，濾膜過(guò)濾，供

HPLC測(cè)定。

5、HPLC條件

色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
檢測(cè)器：UV@ 270 nm

柱溫：室溫
流速：1.0mL/min
進(jìn)樣量：20μL

流動(dòng)相：A:乙腈 B:0.1%甲酸水溶液
洗脫方式：梯度洗脫，
梯度條件如下：

時(shí)間/min	A/%	B/%
0.0	17	83
5.0	17	83
10.0	20	80
22.0	40	60
22.1	90	10
28.0	90	10
29.0	17	83
33.0	17	83

七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、0.2 mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺的添加回收結(jié)果

名稱	1	回收率（%） 2	3	平均回收率（%）	RSD（%）
磺胺吡啶	106.00	106.50	103.00	105.17	1.84
磺胺甲基嘧啶	102.50	104.50	105.50	104.17	1.45
磺胺二甲基嘧啶	104.50	105.00	104.50	104.67	0.28
磺胺對(duì)甲基嘧啶	103.50	102.50	103.50	102.83	0.56

表2 W品牌0.2mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺的添加回收結(jié)果

	回收率（%）
名稱			平均回收率（%）	RSD（%）
	1	2
磺胺吡啶	104.00	110.00	107.00	3.86
磺胺甲基嘧啶	106.50	106.50	106.50	0.00
磺胺二甲基嘧啶	107.00	106.50	106.75	0.33
磺胺對(duì)甲基嘧啶	106.50	107.00	106.75	0.33

2、添加水平為0.2mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺檢測(cè)色譜圖

圖1 添加水平為0.2 mg/kg豬肉基質(zhì)中磺胺檢測(cè)色譜圖

動(dòng)物性食品中磺胺類藥物多殘留檢測(cè)的固相萃取方法

動(dòng)物性食品中磺胺類藥物多殘留檢測(cè)的固相萃取方法 （PolyClean X-MCX）