液相色譜中的氣泡問(wèn)題可能會(huì)影響分析的準(zhǔn)確性和儀器的穩(wěn)定性。以下是一些解決液相色譜氣泡問(wèn)題的常用方法：
### 一、溶劑混合與脫氣
1. **溶劑混合**：
- 當(dāng)兩種或多種溶劑混合時(shí)，由于液體熱力學(xué)體積的變化，易產(chǎn)生氣泡。尤其是放熱或吸熱過(guò)程，如甲醇和水混合放熱，乙腈和水混合吸熱，都可能導(dǎo)致氣泡產(chǎn)生。
- 解決方案：對(duì)溶劑進(jìn)行過(guò)濾和超聲脫氣。對(duì)于乙腈和水等易產(chǎn)生氣泡的溶劑混合，超聲脫氣時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)。此外，也可以安裝在線脫氣機(jī)或采用充氮脫氣等方法。
2. **溶劑脫氣**：
- 溶劑中的溶解氣體在高壓下會(huì)析出形成氣泡，影響分析結(jié)果。
- 解決方案：使用脫氣機(jī)對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理，以減少溶劑中的溶解氣體含量。
### 二、泵及管路系統(tǒng)
1. **泵排氣**：
- 在運(yùn)行泵之前，應(yīng)確保流動(dòng)相中無(wú)氣泡。如果流動(dòng)相未排氣就開(kāi)始運(yùn)行泵，易產(chǎn)生氣泡。
- 解決方案：放好流動(dòng)相后，打開(kāi)旁通閥，用注射器慢慢吸液，觀察進(jìn)液管無(wú)氣泡后再吸10ml將流路中的空氣驅(qū)趕干凈，旋緊旁通閥后再運(yùn)行泵。或者打開(kāi)旁通閥大流速排液，觀察進(jìn)液管無(wú)氣泡后，再排氣2分鐘將流路中的空氣驅(qū)趕干凈。
2. **泵頭及單向閥清洗**：
- 泵頭和單向閥內(nèi)部污染可能導(dǎo)致氣泡產(chǎn)生。泵頭是壓力變化最劇烈的地方，也是最易產(chǎn)生氣泡的地方。
- 解決方案：拆下泵頭，用甲醇或異丙醇超聲清洗單向閥、密封圈和泵頭整體，用酒精棉花擦拭柱塞桿。必要時(shí)更換密封圈、單向閥、柱塞桿等。
3. **溶劑濾頭清洗或更換**：
- 溶劑濾頭污染或堵塞可能導(dǎo)致泵在吸液過(guò)程中吸力不均勻，從而產(chǎn)生微小的真空氣泡。
- 解決方案：根據(jù)濾頭的材質(zhì)選擇合適的處理方式。對(duì)于不可超聲的濾頭，可用5%-10%的稀硝酸溶液浸泡過(guò)夜后用純水清洗；對(duì)于可超聲的濾頭，可直接進(jìn)行超聲處理。若處理未果，需更換新的溶劑濾頭。
### 三、進(jìn)樣系統(tǒng)
1. **進(jìn)樣針清洗**：
- 進(jìn)樣針中帶入氣泡會(huì)影響分析結(jié)果。
- 解決方案：多次沖洗進(jìn)樣針，在進(jìn)樣前注意排除進(jìn)樣針里的氣泡。可以將進(jìn)樣針頭垂直向上，用手指墊上濾紙摁住針頭處，往上推，氣泡很容易就上去了，排出即可。
### 四、色譜柱與流通池
1. **色譜柱沖洗**：
- 如果色譜柱中進(jìn)入氣泡，可以嘗試用純甲醇小流速長(zhǎng)時(shí)間沖洗反相色譜柱，隨后逐步加大流速直至1mL/min，直至色譜柱壓力平穩(wěn)。若無(wú)法解決問(wèn)題，可考慮更換色譜柱。
2. **流通池排氣**：
- 流通池是易積存氣泡的地方，氣泡會(huì)影響基線穩(wěn)定性。
- 解決方案：在廢液出口處加反壓調(diào)節(jié)器為流通池提供一個(gè)背壓；或者用手指堵廢液管出液端，觀察泵柱壓上升后松開(kāi)，同時(shí)看檢測(cè)器顯示屏上吸光度值的變化。如果池內(nèi)有氣泡，則手指堵廢液管時(shí)吸光度值將劇烈變化。當(dāng)手指堵住和松開(kāi)廢液管時(shí)，吸光度值基本不變時(shí)，證明排氣泡成功。此過(guò)程需要重復(fù)多次直至基線穩(wěn)定。
綜上所述，解決液相色譜中的氣泡問(wèn)題需要從溶劑混合與脫氣、泵及管路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)以及色譜柱與流通池等多個(gè)方面入手。通過(guò)合理的操作和維護(hù)措施，可以有效減少氣泡的產(chǎn)生和影響，提高液相色譜分析的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
