內(nèi)標(biāo)法（Internal Standard Method）是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到一定量的被分析樣品混合物中，然后對(duì)含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析，分別測(cè)定內(nèi)標(biāo)物和待測(cè)組分的峰面積（或峰高）及相對(duì)校正因子，按公式即可求出被測(cè)組分在樣品中的百分含量。內(nèi)標(biāo)法是色譜分析中一種比較準(zhǔn)確的定量方法。以下對(duì)內(nèi)標(biāo)的選擇和使用注意事項(xiàng)進(jìn)行介紹：
### 內(nèi)標(biāo)物的選擇
內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)滿足以下條件：
1. **純凈的已知化合物**：內(nèi)標(biāo)物必須是純凈的，具有明確的分子式、分子量和純度標(biāo)準(zhǔn)，以便于準(zhǔn)確稱量和配制。
2. **性質(zhì)相似但不反應(yīng)**：內(nèi)標(biāo)物應(yīng)與被測(cè)組分性質(zhì)相似（如沸點(diǎn)、極性、化學(xué)結(jié)構(gòu)等），但不與被測(cè)組分及樣品中其他組分發(fā)生反應(yīng)，以避免干擾。
3. **含量相近**：加入量應(yīng)與被測(cè)組分含量相近，以便在色譜圖上獲得相近的峰高或峰面積，從而減小測(cè)量誤差。
4. **校正因子相近**：內(nèi)標(biāo)物還應(yīng)具有與被測(cè)組分相近的校正因子，以確保校正的準(zhǔn)確性。
5. **濃度穩(wěn)定**：內(nèi)標(biāo)物的濃度應(yīng)穩(wěn)定，以確保分析過程中的穩(wěn)定性。
6. **原本不存在或含量極低**：樣品中原本不含該組分或含量極低，以避免干擾測(cè)定結(jié)果。
7. **保留時(shí)間有差異**：內(nèi)標(biāo)物的色譜峰應(yīng)與被測(cè)組分的色譜峰能完全分離，且保留時(shí)間有明顯差異，以避免色譜峰共溢出。
8. **化學(xué)穩(wěn)定**：在給定色譜條件下，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，不易發(fā)生分解、氧化等反應(yīng)。
### 使用注意事項(xiàng)
1. **準(zhǔn)確稱量**：應(yīng)準(zhǔn)確稱量內(nèi)標(biāo)物并配制成合適的濃度。
2. **混合均勻**：在加入內(nèi)標(biāo)物前，應(yīng)確保樣品已充分混合均勻，以提高測(cè)定的準(zhǔn)確性。
3. **避免干擾**：應(yīng)確保內(nèi)標(biāo)物不與樣品中的其他組分發(fā)生反應(yīng)或干擾待測(cè)物的測(cè)定。
4. **制作標(biāo)準(zhǔn)曲線**：在進(jìn)行定量分析前，應(yīng)先配制一定重量比的被測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)樣品的混合物做色譜分析，測(cè)量峰面積，制作重量比和面積比的關(guān)系曲線，即標(biāo)準(zhǔn)曲線。實(shí)際樣品分析時(shí)所采用的色譜條件應(yīng)保持與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)所用的條件一致。
5. **單點(diǎn)校正**：在使用過程中應(yīng)定期進(jìn)行單點(diǎn)校正，若所得值與平均值的偏差過大，則應(yīng)重新制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
6. **優(yōu)化濃度**：內(nèi)標(biāo)物的濃度選擇應(yīng)根據(jù)具體的分析對(duì)象和實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。例如，對(duì)于某些高濃度樣品，可能需要選擇較低濃度的內(nèi)標(biāo)物以避免色譜峰飽和；而對(duì)于某些低濃度樣品，則可能需要選擇較高濃度的內(nèi)標(biāo)物以提高測(cè)量的靈敏度。
綜上所述，選擇合適的內(nèi)標(biāo)物并遵循正確的使用注意事項(xiàng)，可以大大提高內(nèi)標(biāo)法定量分析的準(zhǔn)確性和可靠性。
